医院感染消毒灭菌效果监测取样指导

根据《消毒技术规范》的要求，现将我院消毒灭菌效果监测、环境微生学监测的采样方法、结果判定、质控标准等规范如下：

第一章环境卫生学监测

包括空气、物体表面、医务人员手的监测采样及检查原则。采样应具有一定数量和代表性，采样后必须尽快对样品按要求指标进行检测，送检时间不得﹥6小时，若样品保存在冰箱内送检时间不得﹥24小时。

一、空气监测：

1、采样时间：消毒处理后，操作前

2、采样方法：平板沉降法

（1）布点方法。室内面积≤30ｍ²，设内、中、外对角线3点，两端距墙1米；室内面积＞30ｍ²，设东、西、南、北4角及中央5点，其中东、西、南、北均距墙1米。

（2）采样方法。将直径为9cm普通营养琼脂平板在室内各采样点处，采样高度为距地面1.5米，采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露5分钟，盖好立即送检。

（3）计算公式：

空气细菌菌落总数（cfu/m³）=50000n/（a×t）式中a为平板面积（cm2）；t为平板暴露时间（min）；n为平均菌落数（cfu）。

（4）注意事项：采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止

110min进行采样。（5）质控标准。

Ⅰ类区域：细菌总数≤10cfu/m3（或0.2cfu/平板），未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格；

Ⅱ类区域：细菌总数≤200cfu/m3（或4cfu/平板），未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格；

Ⅲ类区域。细菌总数≤500cfu/m3（或10cfu/平板），未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格。

二、医务人员手的监测：

1、采样时间。在接触病人和从事医疗活动前进行采样或消毒后立即采样。

2、采样面积及方法：手的采样：被检人五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次（一只手涂擦面积约30cm2），并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。

采样面积按平方厘米计算；采样结果计算方法：

平板上菌落数×稀释倍数

细菌总数（cfu/cm2）＝────────────────采样面积（cm2）

3、质控标准：Ⅰ、Ⅱ类区域工作人员：细菌总数≤5cfu/cm2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单孢菌为消毒合格。

2Ⅲ类区域工作人员。细菌总数≤10cfu/cm2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。

Ⅳ类区域工作人员。细菌总数≤15cfu/cm2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。

母婴同室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的工作人员手上，不得检出沙门氏菌、大肠杆菌、溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌为消毒合格。

三、物体表面监测

1、采样时间。在消毒处理后进行采样。

2、采样面积。被采表面＜100/cm²，取全部表面；被采表面>100cm²，取100cm²。

3、采样方法：压印采样法：采用一直径为5.6cm（面积约为25cm²）的消毒塑料专用平皿，倾注营养琼脂培养基，并使培养基搞出平皿边缘1-2mm，凝固后置4℃冰箱保存待用。采样时将平皿上的琼脂表面直接压贴在被检物体表面10-20秒后送检。置37℃培养箱培养24-48小时，计算并鉴定细菌。采样结果计算方法：

平板上菌落数×稀释倍数

细菌总数（cfu/cm2）＝────────────────采样面积（cm2）

4、质控标准：Ⅰ、Ⅱ类区域：细菌总数≤5cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。

Ⅲ类区域细菌。总数≤10cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。