冬虫夏草二级接种

1材料和方法

1.1材料

在做二级接种实验时所用的材料：冬虫夏草（cordycepssinensissacc）一级种是由2005年5月从西藏采来的冬虫夏草子实体经无菌分离培养所得。根据多次试验培养基成分结论如下：葡萄糖10g、磷酸氢二钾1g、蛋白胨7g、维生素b2两片、七水硫酸镁0.3g、水1000ml、650ml大米。

1.2方法

药品的称量。对于一克以下的用精确的天平称量。在称量过程中，先调节天平所在的平面平衡以及天平平衡，并在左盘中放张滤纸后也要平衡。然后，制定规格，用药匙向左盘中放入所要称取得药品直到平衡。但要注意先把天平放下来，再取盘中的药品。

大于等于一克的物品用托盘天平量取即可。首先调节托盘天平平衡，在这一过程中，要注意先把游码调到零点，调平后按左物右码的规则。移动游码直到所需的规格，然后，用药匙向左盘中放药品直到平衡，则左盘中的药品即为所称量的。

用量筒量取1000ml的水和650ml的大米。

在进行二级种培养基制作过程中，我们运用了一个方案

将量好的葡萄糖、磷酸氢二钾、蛋白胨，维生素b2、七水硫酸镁，同时溶解在1000ml水中，用玻璃棒搅拌使溶质完全溶解。设总体积为v，称取0.65v大米约650ml的大米，并用自来水冲洗一遍。把冲洗干净的大米和所配制的溶液放入蒸压锅内，蒸成熟米饭，然后冷直室温，再平均装到十个接种瓶（本试验用的是白色耐高温高压的罐头瓶）内。在装的过程中必须使米饭疏松平齐，然后用细绳和单层塑料袋扎上瓶口。完成后再灭菌。